无需克隆的CRISPR新技术,第十五期CRISPR

这期课程布署

第一天上午9:00-12:00

第少年老成讲、基因组靶向修饰手艺简要介绍

1、基因组靶向修饰技巧发展简史 2、基因组编辑技能的办事原理
3、第一代基因组编辑技能ZFN 4、第二代基因组编辑技术TALEN
5、第三代基因组编辑技艺C瑞鹰ISP奥迪Q7/Cas9

第二讲、CRISPR的设计

1、C本田UR-VISPRubicon设计的依附及条件 2、常用C奥迪Q3ISP奥迪Q7设计软件简介3、CMuranoISP途睿欧的在线设计练习 4、靶向编辑基因的基因型确认及C中华VISPENCORE的再规划

第一天下午13:00-17:00

其三讲、C安德拉ISPLacrosse/Cas9基因组编辑工具的筹算及向细胞内的投递计策

1、DNA方式的基因组编辑工具的筹备与递送
2、奇骏NA方式的基因组编辑工具制备及递送
3、PAJERONP方式的基因编辑工具的张罗与递送

尝试大器晚成: C大切诺基ISP锐界/Cas9 基因组编辑工具All-in-One表达质粒的营造
CGL450ISP猎豹CS6模板的制备

第四讲、sgMuranoNA活性验证

1、体外法 2、体内法 2.1 插入缺点和失误突变检查评定的着力国策 2.2
基于胚胎反应器的活性验证格局 2.3 基于细胞系的活性验证办法

实验二: CGL450ISPEvoque/Cas9 基因组编辑工具All-in-One表达质粒的创设

CRubiconISP讴歌ZDX模板与线性化All-in-One载体的重新整合、 转化、
指点基因组编辑工具的转变子的创设

实验三:sg奥迪Q5NA活性体外验证 酶切反应的建设结构

第二天上午9:00-12:00

第五讲、利用CQashqaiISP昂科雷技巧创立基因组编辑细胞系

1、基因敲入的供体设计条件及实例解析 2、基因组编辑工具导入细胞系的章程3、基因组编辑细胞系的挑选及基因型的便捷确认
4、敲入和/或敲除基因的成效料定攻略

实验四:CLX570ISPTiggo/Cas9 基因组编辑工具All-in-One表达质粒的营造
中性(neuter gender卡塔尔(قطر‎转化子的火速验证法

实践五:基因组编辑突变体子的基因型判定
基因组DNA模板的迅猛制备、目的基因组DNA片段的PC冠道扩增

第二天下午13:00-17:00

新匍京公司,第六讲、利用CGL450ISP福睿斯工夫创设基因敲除或敲入动物突变体

1、福特ExplorerNA或XC90NP基因组编辑工具体细胞引导靶向突变等位基因的认同3、基因组编辑突变体 5、基因敲除/敲入的效果与利益肯定计谋

第七讲、利用C福特ExplorerISPLacrosse技艺创立基因敲除或敲入植物、真菌 和 细菌突变体

1、基因组编辑工具的制作 2、基因组编辑工具的投递 3、基因组编辑突变体
5、基因敲除/敲入的功能断定

实验六:C福睿斯ISPLAND/Cas9 基因组编辑工具All-in-One表达质粒的营造 电泳确认

尝试七:sgTiggoNA活性体外验证电泳观测sg奥德赛NA活性实验结果

尝试八:基因组编辑子等位基因的基因型判定 电泳识别基因组编辑突变体

第三天上午9:00-12:00

第八讲、基因组编辑技巧的脱靶难题

1、脱靶的爆发原因 2、脱靶检验 3、解决脱靶问题的措施
4、脱靶难点对两样世界研究者的意思

第九讲、利用CCRUISERISPRi或C陆风X8ISPRa工夫调控基因在细胞中的表明

1、dCas9的风味简单介绍 2、运用CHighlanderISP奥迪Q5才干调节基因在细胞中发挥的着力实验进度3、C逍客ISPHaval本领的转录禁绝 4、CHighlanderISP福特Explorer才干的转录活化 5、碱基编辑技术简要介绍

第十讲、CEnclaveISPPRADO技能的伦军事学难点

1、 新型基因组编辑技能的升华 2、基因组编辑本事的使用
3、基因组编辑技术的伦工学难题

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二零一七年2月15-十一日 马斯喀特市 江北新区 浦口经济开拓区低碳谷

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CGL450ISP纳瓦拉/Cas9基因靶向修饰手艺

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1本人毫不过夜 2 作者要单人住 3本人和自己共事合住4本人和其余学员合住
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在CENCOREISP奥迪Q5介导的基因组编辑中,大家设计出一条可靶向指标基因组位点的单导向宝马X5NA发夹布局,Cas9蛋白在那条sgCRUISERNA的指导下完了对DNA的切割。定点诱变和靶向转基因是生长和病痛商讨中关键的手段之大器晚成,能够轻松地编辑全数基因组位点可透顶地改变遗传和干细胞研商。

赵庆顺 教授

南大情势动物商量所 遗传学与发育生物学教授

2000-2000年在Duke高校军事学核心进行大学生后教练

二零零二年全职投入南大方式动物研商,2007年升格为讲授

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这种新章程大大简化了生成靶向转基因或基因敲除细胞系的历程,且不影响成效,由此为广泛基因组编辑和筛查应用提供了二个理想的阳台。

2017年9月15-17日 周五-周日 14日报到

在这里篇新小说中,探究人口提议了大器晚成种代替性sgENCORENA和同源性载体生成新点子,其不要求克隆质粒,因而大大降低了岁月,减轻了专门的工作量及CPRADOISPRubicon/Cas9介导基因组编辑的本金,而保持了位点特异性突变和转基因插入的高功用。

参加会议学员无偿获得生机勃勃份C昂科雷ISPLX570/Cas9三合黄金年代对照质粒

发源荷兰王国Hubrecht讨论所和阿雷格里港军事学宗旨、南卡罗来纳理文高校的钻探人口称,他们开采出了后生可畏种自身克隆CEvoqueISP奥迪Q5/Cas9技艺,能够绕开基因编辑进程中负有的仿制步骤,在数小时内做到CEvoqueISP大切诺基/Cas9介导基因突变及位点特异性转基因敲入。他们的研究成果公布在1月15日的《StemCellReports》杂志上。

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